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低温感受态的诱导条件?

1. 低温可以减少DNA的热运动,有利于稳定DNA分子与细胞膜之间的吸附作用。这个应该比较好理解,因为Ca2+、DNA(负电)、细胞膜(LPS、负电)之间的静电作用是放热的,因此低温有利(勒夏特列原理)。


2. 低温可以稳定细胞膜上LPS系统上的“洞”,有利于DNA分子与这些洞吸附,从而促进细胞吸收DNA分子。


3. 低温(0℃)与热激温度(42℃)之间的温度差改变细胞膜流动性,促进已吸附的DNA分子吞入。


4. 低温下DNA分子的构象可以保护DNA免受DNase分解。


虽然热激时间过长(optimal 30s)或者温度过高(optimal 42℃)确实会降低转化效率,推测原因是降低细胞生存率,但并没找到说第一步冰浴与细胞survival有关的。应该说,细胞膜的修复是主要在转化的复苏步(37℃)中发生的,因此不能说感受态细胞处于室温下容易死。

匿名回答于2021-04-17 08:53:43


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