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蛋白质的吸光度系数?

含有芳香侧链的氨基酸(酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸)具有强烈的紫外吸收能力。因此,蛋白与肽的浓度和其芳香族氨基酸含量与紫外吸光度是成比例的。一旦确定了给定蛋白的吸光度(氨基酸已确定),其蛋白浓度可以通过吸光度来确定。


  紫外吸收法用于蛋白浓度检测时,最低浓度可达0.1mg/mL,但是对于成分复杂的蛋白溶液(比如细胞裂解物),用紫外吸收就很难估计它们的浓度,因为溶液中组成复杂,具有吸光系数不同的蛋白,除此之外溶液中的核酸也会影响结果。然而,对于绝大多数实验室条件下,用于科研的水溶性蛋白,测量其在280nm吸光度即可最大限度减少其他化合物的干扰。


  蛋白和肽在280nm吸光度主要受色氨酸、酪氨酸和半胱氨酸的影响,上文提到的苯丙氨酸只在较低波长(240-265nm)下吸收。

匿名回答于2020-12-26 06:04:32


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