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westernblot的目的?

Western Blot中文一般称为蛋白质印迹。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。Western Blot显色的方法主要有以下几种:  i. 放射自显影  ii. 底物化学发光ECL  iii. 底物荧光ECF  iv. 底物DAB呈色值得一提的是,western blot 这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Southern的科学家,但印迹的对象是DNA链,他把这种技术称为Southern blot,后来类似的出现了两个过程相似,但是对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个对蛋白质,人们分别把这两种技术的称为Northern和Western,与这两个技术的发明人没有关系了。

匿名回答于2023-09-24 00:25:53


用来检测蛋白质质量

Western blot(也称为蛋白质免疫印迹)是一种常用于研究中分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质,然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上,接下来将膜与对感目标蛋白质的特异抗体一起孵育。

匿名回答于2023-09-22 01:17:30


Western blotting) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。通俗来讲,将蛋白质通过电转固相到膜上,然后利用抗体检测蛋白表达的方法。与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法 Southern blot 相类似,亦被称为Western blot。

Western Blotting可用于:

从细胞或组织总蛋白中检测目标蛋白;

定量或定性确定目标蛋白表达水平;

蛋白-蛋白,DNA-蛋白,RNA-蛋白相互作用的检测分析。

匿名回答于2023-09-22 01:17:32


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